鬼筆環(huán)肽|phalloidin|鬼筆鵝膏素
鬼筆環(huán)肽從一種毒性菇類中分離的劇毒生物堿，C35H48N8O11S。無色，細(xì)針狀結(jié)晶，系從毒蕈類鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）中得到的有毒的環(huán)狀七肽。與鵝膏蕈堿（amanitin）一起存在，毒性比鵝膏蕈堿弱，對(duì)小鼠的致死劑量是50微克，對(duì)人體也有很強(qiáng)的毒性，可引起流涎、嘔吐、便血、發(fā)紺、痙攣、肌肉攣縮，以致死亡。它同細(xì)胞松弛素Ｂ的作用相反, 只與聚合的微絲結(jié)合, 而不與肌動(dòng)蛋白單體分子結(jié)合。它同聚合的微絲結(jié)合后, 抑制了微絲的解體, 因而破壞了微絲的聚合和解聚的動(dòng)態(tài)平衡。鬼筆環(huán)肽可以與聚合的微絲結(jié)合的特殊性質(zhì)使得它具有一個(gè)頗富前景的用途：通過讓這種**吸附于熒光染料上面，研究人員可以研究細(xì)胞的內(nèi)部工作機(jī)制，窺視細(xì)胞如何分裂。通過這些觀察，他們可以揭開癌癥工作機(jī)制和組織生長(zhǎng)之謎。
美國(guó)加州大學(xué)圣克魯斯分校的兩位化學(xué)家斯科特·洛基和勞拉·舒利斯科(Laura Schuresko)利用一種稱為固相合成(solid-phase synthesis)的手法，制造出這種致命物質(zhì)。他們不是將幾種化學(xué)物質(zhì)放入燒瓶混合，讓它們自由飄浮，而是在化學(xué)反應(yīng)期間對(duì)其中一種化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行適當(dāng)約束，這樣一來，研究人員在復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)過程中可以更好地對(duì)其進(jìn)行控制。
FITC和Rhodamin等熒光物質(zhì)標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽可特異的與真核細(xì)胞的F-actin結(jié)合，從而顯示微絲骨架在細(xì)胞中的分布。鬼筆環(huán)肽的配制：0.1mg鬼筆環(huán)肽溶于1ml無水甲醇（也可用DMSO或無水乙醇溶解）配成貯存液，可在-20度避光的條件下長(zhǎng)期保存，工作液的濃度為5ug/ml，由貯存液加生理鹽水PBS稀釋20倍即可。
染色程序：生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次，每次10分鐘；3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分鐘，生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次；加入5ug/ml的FITC-鬼筆環(huán)肽室溫染色30-60分鐘，夏季時(shí)間可以短一些，生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次；DAPI或hoechst33258染細(xì)胞核10分鐘，生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次；吸去多余水分，加熒光封片液（中性或偏堿性緩沖液加等量甘油），蓋上蓋玻片，熒光或共聚焦顯微鏡下觀察。
注意事項(xiàng)：鬼筆環(huán)肽的分子量小，很容易通過細(xì)胞，不需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和TRITON X-100處理。毒性較大，戴上手套操作。
| Conjugate | Cat.# | Wavelengths (Ex/Em) | Brightness (AFU*) | Stability to
photobleaching
(half life in seconds) | Background
(% of total
AFU at 100nM) | Affinity
(Kd in
nanomolar) |
| Fluorescein-phalloidin | na | 485/535 FITC filter set | 432 | 6 | 22 | 72 +/-12 |
| Acti-stain™ 488 | PHDG1 | 485/535 FITC filter set | 832 | 57 | 5 | 55 +/-8 |
| Acti-stain™ 535 | PHDR1 | 535/585 TRITC filter set | 430 | 27 | 12 | 36 +/-7 |
| Acti-stain™ 555 | PHDH1 | 535/585 TRITC filter set | 551 | 46 | 16 | 63 +/-8 |
| Acti-stain™ 670 | PHDN1 | 640/680 Cy5 filter set | 332 | 8 | 18 | 50 +/-12 |
產(chǎn)品訂購(gòu)
| 產(chǎn)地 | 貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) | 單價(jià) |
| cytoskeleton | PHDR1 | Rhodamine Phalloidin 羅丹明標(biāo)記 | 500ul | PHDR1 | 1818元 |
| cytoskeleton | PHDG1-A | Acti-stain™ 488 phalloidin 綠色熒光標(biāo)記 | 500u | PHDG1-A | 2298元 |
| cytoskeleton | PHDH1-A | Acti-stain™ 555 phalloidin 紅色熒光標(biāo)記 | 500u | PHDH1-A | 2298元 |
| cytoskeleton | PHDN1-A | Acti-stain™ 670 phalloidin藍(lán)色熒光標(biāo)記 | 500u | PHDN1-A | 2298元 |
Cytoskeleton公司成立于1993年，專注于生物化學(xué)和細(xì)胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。Cytoskeleton公司的鬼筆環(huán)肽品質(zhì)不會(huì)比Invitrogen公司旗下品牌Molecular Probes品質(zhì)差，國(guó)內(nèi)有很多實(shí)驗(yàn)室在廣泛使用。Cytoskeleton公司提供**篩選、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品，尤其以細(xì)胞骨架相關(guān)研究見長(zhǎng)，既能滿足于樣品較少的科學(xué)研究，也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動(dòng)蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的**篩選服務(wù)。
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Phalloidin–Tetramethylrhodamine B isothiocyanate
Phalloidin from Amanita phalloides
別名: Phalloidin-TRITC
性質(zhì)
| Related Categories | In Vivo/In Vitro Tracking of Stem Cells, Actin Inhibitors and Probes, Albumin and other protein conjugates, Bioactive Small Molecules, Biochemicals and Reagents, |
| biological source | Phalloidin from Amanita phalloides |
| fluorescence | λex 540-545 nm; λem 570-573 nm |
| storage temp. | −20°C |
參考文獻(xiàn)
Preparation of tetramethylrhodaminyl-phalloidin and uptake of the toxin into short-term cultured hepatocytes by endocytosis. Faulstich, H., et al. Exp. Cell Res. 144, 73, (1983)
Multiple spectral parameter imaging. Waggoner, A. Methods Cell Biol. 30, 449, (1989)
Functional Characterization Of Negri Bodies (NBs) In Rabies Virus-infected Cells: Evidence That NBs Are Sites Of Viral Transcription And Replication. Lahaye, X., et al. J. Virol. 83, 7948-58, (2009)
Sds22, A PP1 Phosphatase Regulatory Subunit, Regulates Epithelial Cell Polarity And Shape [Sds22 In Epithelial Morphology]. Grusche, F.A., et al. BMC Dev. Biol. 9, 14, (2009)
Opposing Interactions Between Drosophila Cut And The C/EBP Encoded By Slow Border Cells Direct Apical Constriction And Epithelial Invagination. Levine, B., et al. Dev. Biol. 344, 196-209, (2010)
Doubles Game: Src-Stat3 Versus P53-PTEN In Cellular Migration And Invasion. Mukhopadhyay, U.K., et al. Mol. Cell. Biol. 30, 4980-95, (2010)
Selective Ablation Of The Androgen Receptor In Mouse Sertoli Cells Affects Sertoli Cell Maturation, Barrier Formation And Cytoskeletal Development. Willems, A., et al. PLoS ONE 5, e14168, (2010)
The Drosophila Blood Brain Barrier Is Maintained By GPCR-dependent Dynamic Actin Structures. Hatan, M., et al. J. Cell Biol. 192, 307-19, (2011)
Differential Effects Of Prenylation And S-acylation On Type I And II ROPS Membrane Interaction And Function. Sorek, N., et al. Plant Mol. Biol. 155, 706-20, (2011)
**信息
| 符號(hào) |  GHS06 |
| 信號(hào)詞 | Danger |
| 危險(xiǎn)聲明 | H300-H310-H330 |
| 警示性聲明 | P260-P264-P280-P284-P301 + P310-P302 + P350 |
| 個(gè)人防護(hù)裝備 | Eyeshields, Faceshields, full-face respirator (US), Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US), type ABEK (EN14387) respirator filter |
| 危害碼 (歐洲) | T+ |
| 風(fēng)險(xiǎn)聲明 (歐洲) | 26/27/28 |
| **聲明 (歐洲) | 22-28-36/37-45 |
| RIDADR | UN 2811 6.1/PG 2 |
| WGK德國(guó) | 3 |
