1. 采用十字交叉連續(xù)稀釋分析法確定抗原濃度，抗原濃度一般為0.2 to 10μg/ml，*好不要超過(guò)20μg/ml。
2. 將50μl用碳酸鹽包被緩沖液稀釋的抗原加入96孔酶標(biāo)板中，用塑料膜板將孔板覆蓋后置于室溫2小時(shí)或4度過(guò)夜。
3. 棄去包被液用洗滌液洗滌3次，輕拍孔板使洗滌液甩干。

1. 每孔中加入200μl封閉液（1%BSA或5%脫脂牛奶等），蓋上膜板，室溫封閉至少2小時(shí)或4度過(guò)夜。
2. 封閉后用PBS洗滌兩次。

1. 每孔加入稀釋好的抗體100μl，室溫孵育2小時(shí)或4度過(guò)夜。
2. 孵育后用洗滌液洗滌四次。

每孔加入100μl的底物溶液，待顯色充分后加入100μl的終止液并在酶標(biāo)儀上測(cè)定相應(yīng)波長(zhǎng)吸光度值。

1. 采用十字交叉連續(xù)稀釋分析法確定抗原濃度，抗原濃度一般為0.2 to 10μg/ml，*好不要超過(guò)20μg/ml。
2. 將50μl用碳酸鹽包被緩沖液稀釋的抗原加入96孔酶標(biāo)板中，用塑料膜板將孔板覆蓋后置于室溫2小時(shí)或4度過(guò)夜。
3. 棄去包被液用洗滌液洗滌3次，輕拍孔板使洗滌液甩干。

1. 每孔中加入200μl封閉液（1%BSA或5%脫脂牛奶等）室溫封閉至少2小時(shí)或4度過(guò)夜。
2. 封閉后用PBS洗滌兩次。

1. 每孔加入100μl稀釋好的一抗，蓋上膜板，室溫孵育2小時(shí)。
2. 孵育后洗滌液洗滌四次。
3. 加入100μl稀釋好的標(biāo)記二抗，繼續(xù)孵育1-2小時(shí)。
4. 洗滌液洗滌四次。

每孔加入100μl的底物溶液，待顯色充分后加入100μl的終止液并在酶標(biāo)儀上測(cè)定相應(yīng)波長(zhǎng)吸光度值。

1. 將50μl用碳酸鹽包被緩沖液（pH 7.4）稀釋的抗體加入96孔酶標(biāo)板中，一般抗體濃度為1-10μg/ml。
2. 蓋上膜板包被4度過(guò)夜。
3. 棄去包被液用洗滌液洗滌2次，輕拍孔板使洗滌液甩干。

1. 每孔中加入200μl封閉液（1%BSA或5%脫脂牛奶等）室溫封閉1-2小時(shí)或4度過(guò)夜。
2. 每孔加入100μl稀釋好的樣品，37度孵育90分鐘。
3. 甩去孔板里面的溶液，洗滌液洗滌2次。

1. 每孔加入100μl稀釋好的檢測(cè)抗體，室溫孵育2小時(shí)。
2. 孵育后洗滌液洗滌四次。
3. 每孔加入100μl稀釋好的標(biāo)記二抗，繼續(xù)室溫孵育1-2小時(shí)。
4. 孵育后洗滌液洗滌四次。

每孔加入100μl的底物溶液，待顯色充分后加入100μl的終止液并在酶標(biāo)儀上測(cè)定相應(yīng)波長(zhǎng)吸光度值。