Trizol Reagent,總RNA抽提試劑,Trizol
Trizol Reagent
簡介:TRIzol是一種新型總RNA抽提試劑，可以直接從細胞或組織中提取總RNA。其含有苯酚、異硫氰酸胍等物質，能迅速破碎細胞并抑制細胞釋放出的核酸酶。
TRIzol在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性，因此對純化DNA及標準化RNA的生產十分有用。
TRIzol的成分:
TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細胞，使細胞中的蛋白，核酸物質解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIzol中還加入了8－羥基喹啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase（RNA酶）。
※0.1%的8－羥基喹啉可以抑制RNase，與氯仿聯合使用可增強抑制作用。
※異硫氰酸胍屬于解偶劑，是一類強力的蛋白質變性劑，可溶解蛋白質并使蛋白質二級結構消失，導致細胞結構降解，核蛋白迅速與核酸分離。
※β-巰基乙醇的主要作用是破壞RNase蛋白質中的二硫鍵。
TRIzol的使用方法:
用勻漿器將組織磨碎，加入TRIzol處理組織。5分鐘后加入氯仿，以每分鐘12000轉離心5分鐘，樣品即分成水樣層、中間層和有機層。
※RNA存在于水樣層中，收集水樣層后可以通過異丙醇沉淀RNA來還原。
※在除去水樣層后，有機層中的DNA和蛋白質也能相繼以沉淀的方式還原：乙醇能使中間層的DNA沉淀析出，在有機層中加入異丙醇能沉淀出蛋白質。
每100ml TRIzol可以抽提100個六孔板中的樣品或100個50-80mg的組織樣品。無論樣品是人、動物、植物還是**組織，該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(約五百萬個)及大量的組織(≥1g)和細胞(超過一千萬個)均有較好的分離效果。
每一百萬細胞用TRIzol抽提可得5-15微克RNA，每毫克組織用TRIzol抽提可得1-10微克RNA（產量因細胞和組織不同而異）。
TRIzol操作上的簡便性允許其同時處理多個樣品，所有的操作可以在一小時內完成。
TRIzol抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白質的污染，故而能夠作RNA 印跡分析、斑點雜交、poly(A)+ 選擇、體外翻譯、RNA酶保護分析和單分子克?。?/span>PCR）。
※如果是用于PCR，當兩條引物位于單一外顯子內時，建議用級聯擴大的DNase I(Cat. No. 18068)來處理抽提的總RNA。
※TRIzol試劑能促進不同種屬、不同分子量大小的多種RNA的析出。例如，從大鼠肝臟抽提的RNA經過瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色，可見許多介于7kb和15kb之間的不連續(xù)的高分子量條帶（mRNA和hnRNA成分），兩條優(yōu)勢核糖體RNA條帶位于~5 kb (28S)和~2 kb (18S)，低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間 (tRNA, 5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時，其A260/A280比值≥1.8。抽提小RNA時宜-70℃沉淀過夜。
TRIzol對人體有害，使用時應戴一次性手套，注意防止濺出。
Invitrogen相關資料:
Invitrogen一步法總RNA提取試劑/Trizol Reagent
使用Invitrogen公司的TRizol試劑，可快速簡單地獲得高純度總RNA。
Invitrogen公司的一步法總RNA提取試劑TRIZOL比其他純化方法可提高產率30%-150%。這種TRIZOL試劑的酚和異硫氰酸胍的均相溶液可直接用于從人類、動物、植物、**等的細胞或組織中提取總RNA、DNA或蛋白質。
TRIZOL試劑純化的RNA可用于PCR、RNA印跡分析、poly(A)+篩選或斑點雜交。純化的DNA和蛋白質分別適用于DNA和蛋白質印跡分析。
◆ 獲得高純度RNA（A260/A280>1.9）
◆ 在1小時內分離RNA；在3小時內分離DNA或蛋白質
◆ 鮮明的紅色染料使去除含RNA的液相簡單便捷
◆ 無論是小量的細胞（5×106）或組織（50-100mg）還是大量的細胞（107）或組織（>1g）都可得到出色的結果
◆ 在4℃條件下可穩(wěn)定保存兩年以上
◆ 可使用TRIZOL用于組織或細胞；使用TRIZOL LS用于血液或其他液體樣品
品名: TRIzol Reagent
Cat. No. 15596-026
TRIzol® Reagents are ready-to-use, monophasic solutions of phenol and guanidine isothiocyanate suitable for isolating total RNA, DNA, and proteins (1-6). Isolation procedures are based upon improvements to the single-step RNA isolation method
General Specifications
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Brand
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TRIzol®
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Final Product
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Transcriptome RNA
micro RNA
Total RNA
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High Throughput Compatibility
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Manual Protocols
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Isolation Technology
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Organic Extraction
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Number of Reactions
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100 Preps
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Product Size
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100 ml
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Purification Time
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1 hr
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Quantity
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1
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Sample Type (General)
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Viral Samples
Plant Samples
Tissue
Blood
Bacteria
Yeast
Cells
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Scale
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Scaleable
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Starting Material (Cell #)
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Up to 1g Tissue, Up to 1 x 10^7 cells
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System
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TRIzol
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Yield (up to)
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8 mg
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Top Contents & Storage:
TRIzol® and TRIzol® LS Reagents include the indicated amount of reagent. The TRIzol® Max™ Bacterial RNA Isolation Kit contains TRIzol® Reagent and Max Bacterial Enhancement Reagent. Store at 2°C to 8°C.
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品名
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產地
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貨號
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規(guī)格
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單價
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備注
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TRIzol Reagent;TRIzol ; 一步法總RNA提取試劑
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Invitrogen
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15596-026
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100ml
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詢價
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現貨
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