均相酶**測定是將半抗原或小分子抗原如**、**、毒品、興奮劑等與酶結(jié)合制成酶標記物，酶與抗原(半抗原)結(jié)合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性。測定時將待測樣品、酶標記物、特異性抗體和底物溶液加在一起，待抗原—抗體和酶底物反應平衡后，即可直接測定結(jié)果，無需分離步驟，整個檢測過程都在均勻的液相內(nèi)進行。依據(jù)實驗原理可分為競爭結(jié)合法和非競爭結(jié)合法兩種類型。

1、酶擴大**測定技術

 酶擴大**測定技術(enzyme multiplied immunoassaytechnique，EMIT)，由美國SYVA公司*先研制成功，主要用于小分子抗原或半抗原的測定，在**測定中應用*多。

原理：半抗原與酶結(jié)合成酶標半抗原，保留半抗原和酶的生物活性，當酶標半抗原與抗體結(jié)合后，半抗原分子上的酶蛋白與抗體密切接觸，使酶的活性中心受到影響，酶的活性受到抑制。測定時標本中的半抗原、酶標半抗原與抗體競爭性結(jié)合，標本中的半抗原含量越高，加底物后其OD值越高。

如將毒品(如**及其衍生物)與溶菌酶結(jié)合成酶標記物，測定時將待測樣品、酶標記物與抗體一起混合，讓前二者與其相應抗體競爭結(jié)合后，加酶底物(藤黃微球菌)，測定反應體系酶的活性；若酶標抗原與抗體結(jié)合后，抗體與標記的酶緊密接觸，使酶的活性中心受到影響，而其酶活性受抑制；若待測樣品中抗原與抗體結(jié)合，酶的活性得以發(fā)揮，酶的活性與待測樣品中抗原的量成正比，測定酶活性以標準曲線推算出待測抗原的量。

2、克隆酶供體**測定技術

 利用DNA重組技術制備β-半乳糖苷酶的兩個片段，大片段為酶受體（enzyme　acceptorEA），小片段為酶供體（enzyme donor ED），單獨的兩個片段均無活性，在一定條件下結(jié)合后可顯示酶的活性。

抗原（待測）+ 抗體 + 抗原-ED = 抗原（待測）-抗體 + 抗體-抗原-ED

抗體-抗原-ED 具有酶的活性，加底物顯色。

一類是抗體能增強酶的活性，將甲狀腺素(T-)與蘋果酸脫氫酶(MDH)共價結(jié)合成酶標記物后，MDH活性被抑制；當標記抗原與特異性抗體結(jié)合時，被抑制的酶的活性可逆性地恢復；如樣品中T4含量增多，競爭結(jié)合抗體，MDH活性仍被抑制；酶的活性與待測樣品中抗原的量成反比。

上述酶標抗原與抗體結(jié)合后，酶的活性增強與減弱是由于抗原與抗體的結(jié)合位置鄰近酶的活性中心。也有用直接與酶活性中心反應的輔助因子或底物等小分子化合物標記抗原，若標記抗原與抗體結(jié)合將會干擾這些小分子化合物與酶的結(jié)合，從而使酶的活性受抑制。如輔基標記**分析法、克隆酶供體**分析法、底物標記熒光**分析法等。

均相酶**測定操作簡便、快速、適合于自動化，應用廣泛，不僅可檢測**、**、毒品、興奮劑等半抗原或小分子抗原，也可測定大分子蛋白質(zhì)、病毒及細胞性抗原成分。